30立方米空氣調(diào)節(jié)器除病毒試驗(yàn)艙試驗(yàn)步驟（一）

30立方米空氣調(diào)節(jié)器除病毒試驗(yàn)艙有兩種評(píng)價(jià)空氣調(diào)節(jié)器除病毒的試驗(yàn)方法，分別為物體表面上的病毒殺滅測(cè)試和氣溶膠中的病毒去除測(cè)試，前者適用于采用化學(xué)因子和其他因子消毒的空氣調(diào)節(jié)器，后者適用于采用物理因子、化學(xué)因子和其他因子消毒的空氣調(diào)節(jié)器。

30立方米空氣調(diào)節(jié)器除病毒試驗(yàn)艙物體表面上的病毒殺滅測(cè)試：
1、適用的病毒種類(lèi)
根據(jù)試驗(yàn)安全風(fēng)險(xiǎn)，物體表面上的病毒殺滅測(cè)試主要針對(duì)手足口病毒、甲型流感病毒、冠狀病毒以及其他低致病性或非致病性病毒。

2、試驗(yàn)樣塊的制備
用符合GB/T 411要求的中漂白中平布，其經(jīng)紗為(21+2)支數(shù)，緯紗為(21+2)支數(shù)，經(jīng)過(guò)脫漿預(yù)處理制成的50 mm*50 mm的方巾。試驗(yàn)前，所有試驗(yàn)樣塊應(yīng)在121 C條件下滅菌20 min,烘干后備用。

3、試驗(yàn)步驟
a)試驗(yàn)第一天，將試驗(yàn)用細(xì)胞接種到96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，待細(xì)胞生長(zhǎng)匯合至單層時(shí)備用;
b)將滅菌干燥后的試驗(yàn)樣塊置于無(wú)菌培養(yǎng)皿中,用移液槍吸取0.5mL病毒液逐滴均勻地滴加在試驗(yàn)樣塊表面，室溫條件下待表面微干即可使用;
c)將試驗(yàn)樣機(jī)放置于30m'試驗(yàn)艙中,分體掛壁式空氣調(diào)節(jié)器放置在艙體的--側(cè)，下沿離地1.8m，分體落地式空氣調(diào)節(jié)器按照正常安裝方向放置于試驗(yàn)艙地面中心位置，吊頂式空調(diào)按照正常安裝方向放置于試驗(yàn)艙地面中心位置。將制備好的試驗(yàn)樣塊固定于試驗(yàn)樣機(jī)出風(fēng)口正中央直線距離1.5 m處；
d)調(diào)節(jié)艙體環(huán)境，滿足試驗(yàn)環(huán)境要求后，運(yùn)行樣機(jī)，作用最長(zhǎng)不超過(guò)360 min。作用結(jié)束后將對(duì)照組與試驗(yàn)組布片分別轉(zhuǎn)移至50 mL離心管中，加入4.5 mL無(wú)血清DMEM培養(yǎng)基，反復(fù)吹打釋放病毒，同時(shí)取0.5 mL病毒液加入4.5 mL無(wú)血清DMEM培養(yǎng)基，吹打混勻作為陽(yáng)性對(duì)照；
e)取上述對(duì)照組、試驗(yàn)組、陽(yáng)性對(duì)照各1 mL病毒液上清，離心(3000g, 5min) ，將上清轉(zhuǎn)移至新的EP管，并用無(wú)血清DMEM培養(yǎng)基10倍梯度稀釋?zhuān)?br/>f)將50 μL的病毒稀釋液加入生長(zhǎng)至步驟a)的單層細(xì)胞，每個(gè)稀釋度設(shè)置4孔重復(fù)；
g)置于37℃、5%CO2孵育2小時(shí)，棄去上清液，加入含雙抗和1 μg/mL TPCK胰酶的無(wú)血清培養(yǎng)基，培養(yǎng)4-5天；
h)每天觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況，記錄病變情況。根據(jù)Reed-Muench公式計(jì)算半數(shù)組織感染量TCID50；
i)試驗(yàn)重復(fù)三次， 根據(jù)試驗(yàn)組和對(duì)照組的平均病毒滴度對(duì)數(shù)值/滴度，計(jì)算病毒殺滅對(duì)數(shù)值/殺滅率。

30立方米空氣調(diào)節(jié)器除病毒試驗(yàn)艙物體表面上的病毒殺滅測(cè)試到此結(jié)束。